2018年21期

一个耐镉基因过表达载体构建及转基因植株的筛选鉴定

作  者 严星星,欧阳剑,黄 莹,盛义保,张 乘,曹树青
第一作者 严星星
作者单位 合肥工业大学食品科学与工程学院,安徽合肥
卷  号 46
发表年份 2018
发表刊期 21
发表页面 116-118
关  键  字 拟南芥;MNB1基因;过表达;转基因植株,
摘  要 [目的]进一步研究MNB1基因在植物应对镉胁迫响应中的功能,构建拟南芥中MNB1基因过量表达载体,通过筛选鉴定最终获得相应的转基因植株。[方法]以野生型拟南芥cDNA为模板,PCR扩增MNB1基因全长,将该基因连接到过量表达载体上;然后将构建成功的重组载体转化至农杆菌菌株GV3101,浸花法转化野生型植株;最后利用转基因筛选与遗传鉴定获得MNB1转基因阳性植株。[结果]MNB1基因CDS全长1 368 bp,酶切连接后转化大肠杆菌鉴定得到阳性菌落,测序结果经比对完全正确。通过抗性筛选及PCR电泳检测获得阳性转基因植株。[结论]MNB1基因过表达载体构建成功并获得相应转基因植株,为进一步研究该基因调控植物镉胁迫响应中的功能及其分子机制奠定基础。
附  件 一个耐镉基因过表达载体构建及转基因植株的筛选鉴定
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