2018年20期

一个耐硒基因过表达载体的构建及转基因植株的筛选鉴定

作  者 钱靓雯,欧阳剑,孟云,樊婷婷
第一作者 钱靓雯
作者单位 合肥工业大学食品科学与工程学院,安徽合肥
卷  号 46
发表年份 2018
发表刊期 20
发表页面 86-88
关  键  字 拟南芥;WRKY47基因;过表达;转基因植株,
摘  要 [目的]进一步验证WRKY47基因在调控硒胁迫应答中的功能,构建WRKY47过表达载体,获得相应的转基因株系。[方法]以野生型拟南芥的cDNA为模板,利用PCR扩增WRKY47基因全长,将该基因连接到pBI121载体上。将获得的重组载体转化至农杆菌菌株GV3101,通过浸化转化法将WRKY47重组质粒转化到拟南芥野生型植株中,利用转基因筛选与遗传鉴定获得WRKY47转基因阳性植株。[结果]扩增获得WRKY47基因,CDS全长1 470 bp,连接转化并获得测序正确的重组载体pBI121-WRKY47。通过抗性筛选和分子鉴定获得阳性转基因植株。[结论]成功构建过表达载体并获得相应的转基因株系,为进一步研究该基因的分子机制奠定基础。
附  件 一个耐硒基因过表达载体的构建及转基因植株的筛选鉴定
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